ELISA分析儀器

    ELISA試劑技術(shù)20世紀80年代引入中國，現已被廣泛應用。與之相關(guān)的分析儀器也得到了快速發(fā)展，我國先后出現了十余家酶標儀、洗板機生產(chǎn)廠(chǎng)商，在中國市場(chǎng)上與眾多的進(jìn)口酶標儀器進(jìn)行緊張競爭。下面分三個(gè)方面對ELISA中有關(guān)儀器及其在中國的應用作一簡(jiǎn)要介紹。

    分離式酶聯(lián)免疫儀器

    分離式酶聯(lián)免疫儀器主要有酶標儀、洗板機。在血清離心之后，經(jīng)過(guò)加樣、洗板、孵育等過(guò)程，后通過(guò)吸光度判定結果。ELISA實(shí)驗在國內主要用于定性檢驗，故目前的分離式儀器基本上可以滿(mǎn)足。

    酶標儀本質(zhì)上是一臺于微孔板的、可見(jiàn)光范圍的光電比色計。在ELISA實(shí)驗中，酶標儀是測定各微孔中試樣的吸光度的關(guān)鍵儀器，對試驗結果的判定有直接影響，是實(shí)驗室*的重要儀器之一。隨著(zhù)ELISA技術(shù)的普及，酶標儀得到了很大發(fā)展，產(chǎn)品種類(lèi)齊全，型號多樣，各有特色。目前國內市場(chǎng)上銷(xiāo)售的酶標儀已*擺脫原來(lái)的單孔測量方式，整板測量、定性定量計算、存儲、多種報告格式、濾光片自動(dòng)轉換等已成為基本的、*的功能，各種新推出的酶標儀性能日益完善，功能不斷擴充。具體有：

• 測量高速化  從目前不斷推出的酶標儀趨勢來(lái)看，整板測量速度均在10s以?xún)?，這有利于防止測量過(guò)程中各微孔吸光度的微小變化，盡可能克服環(huán)境對結果的影響，同時(shí)可以滿(mǎn)足動(dòng)力測量的要求，測量速度在20s以上的儀器將處于不利于地位。我國現生產(chǎn)的酶標儀，測量整板速度一般為25s,產(chǎn)品更新周期較長(cháng)。
• 寬吸光度范圍   盡管酶標儀A=0-2.5的吸光度范圍*可以滿(mǎn)足實(shí)驗的要求，但國外新推出的儀器都擴寬了早期型號的吸光度范圍，較的酶標儀其線(xiàn)性范圍可以達到A=4.0，并且保持很好的精密度，如BIORAD公司的Benchmark,在400-750nm、A=0-4.0時(shí)其重復性與線(xiàn)性均不大于3.5%。又如LABYSTEMS公司的Multi-skan Ascent,其吸光度讀數范圍達A=0-4.0，在A(yíng)=3.0-4.0范圍，其線(xiàn)性不超過(guò)2%, RSD小于1.0%。
• 擴展到紫外  增加紫外濾光片幾乎是廠(chǎng)商的共同選擇。由于各種酶標儀都配有放置濾光片的可自動(dòng)轉換的機構，可以同時(shí)安裝6-8片濾光片，擴展紫外功能相對容易，一般都增加340nm濾光片。
• 具有孵育功能  可以自動(dòng)、控制反應溫度，使微孔板的孵育過(guò)程在儀器內部完成，降低外界干擾，簡(jiǎn)化操作步驟。如BIORAD公司的Benchmark,芬蘭LABSYSTEMS公司的Multiskan  Ascent,BIOTCK公司的EIX808等。
• 具有動(dòng)力學(xué)檢測功能   常規ELISA是一種終點(diǎn)法 測量實(shí)驗，測量前需要加入終止液來(lái)抑制酶免反應的進(jìn)行，通過(guò)吸光度的大小來(lái)計算待測物質(zhì)的濃度，動(dòng)力學(xué)方法是通過(guò)測定反應過(guò)程中吸光度的變化速率來(lái)計算相應的待測物質(zhì)的含量的，酶標儀的測量速度加快后，只要增加相應的軟件，就可以使用酶標儀完成某些生化指標的動(dòng)力學(xué)測量。

洗板機是ELISA試驗保證洗滌效果、進(jìn)而保證實(shí)驗質(zhì)量的重要儀器，洗板機的作用已不再是簡(jiǎn)單的代替人的手工勞動(dòng)的自動(dòng)化裝置。目前國內的洗板機除提供常規的設備清洗次數、清洗條數、浸泡時(shí)間等基本功能之外，還根據用戶(hù)的需要分別增加了底部沖洗、兩點(diǎn)吸液、板式/條式洗板、震蕩、位置調節及自動(dòng)清洗管路、自動(dòng)換液存儲多種洗板程序等功能，清洗殘留量由原來(lái)的5-6UL/孔減小到2UL/孔，有的洗板機允許用戶(hù)對洗板過(guò)程的每一步的流量、時(shí)間、位置等進(jìn)行詳盡的設定。生產(chǎn)廠(chǎng)商根據各自對洗板技術(shù)的研究，努力提高儀器可靠性與自動(dòng)化程度，同時(shí)為用戶(hù)提供一個(gè)合適、完善的洗滌環(huán)境。國內洗板機就洗板效果、產(chǎn)品可靠性等主要指標已達到進(jìn)口以前的水平，與進(jìn)口儀器相比，其價(jià)格、售后服務(wù)占一定優(yōu)勢，主要差距是無(wú)定量加液。

組合式的酶聯(lián)免疫儀器

 組合式的酶聯(lián)免疫儀器分三類(lèi)：全自動(dòng)酶聯(lián)免疫系統、自動(dòng)樣品處理系統、流水線(xiàn)作業(yè)式組合系統。前兩者主要用于各大血站、醫院，后者主要用于試劑生產(chǎn)廠(chǎng)商。

全自動(dòng)酶聯(lián)免疫系統是將ELISA試驗中的各個(gè)步驟，從加樣、孵育、洗滌、震蕩、閉塞到定性或定量分析、報告存儲與打印功能全部集成在一臺儀器中，由儀器按用戶(hù)事先設計的程序自動(dòng)進(jìn)行。HAMILTON公司的FAME(世界上臺自動(dòng)板式ELISA系統)、BIORAD公司的CAA、奧斯邦公司的AMP、TECAN公司的Minilyser、ORGANO公司的TEKTIME、意大利S.P.A. DIVISION  STRUMENTI的PersonaiLAB等全自動(dòng)酶聯(lián)免疫系統已先后進(jìn)入國內市場(chǎng)。近兩年新進(jìn)入中國市場(chǎng)還有DYNDRX、公司的DSX、 阿克蘇公司的Flextk2、BIOASIA代理的TRITURUS等。全自動(dòng)酶聯(lián)免疫系統的出現滿(mǎn)足了各大醫院、血站大批量重復檢驗的要求，提高了這些單位的檢查檢驗效率與實(shí)驗水平，有效控制了大批量檢驗中極有可能出現的人工操作失誤，有利于ELISA實(shí)驗的質(zhì)量保證與提高，其國內市場(chǎng)穩步增長(cháng)。

自動(dòng)樣品處理系統主要用于完成ELISA實(shí)驗中的繁瑣無(wú)味、人工容易出錯的加樣、稀釋滴定、孵育、洗滌等步驟，完成之后再由酶標儀判定結果。使用自動(dòng)樣品處理系統利用原有的酶標儀，既節約資金，又實(shí)現了實(shí)驗過(guò)程的自動(dòng)化，是一種很經(jīng)濟的方案。

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