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    ELISA檢測e抗原靈敏度更高
    點(diǎn)擊次數:2263 更新時(shí)間:2018-08-14

    ELISA檢測e抗原靈敏度更高

     

    E抗原是從乙肝表面抗原(HBsAg)陽(yáng)性血清中發(fā)現的一種新抗原,他可能與乙型肝炎的傳染性有密切關(guān)系。李羽等報道用ELISA檢測e抗原的靈敏度比瓊脂免疫擴散法高150—300倍。試驗程序:

    1.病人免疫球蛋白IgG(e抗體)的提?。河蔑柡土蛩徜@沉淀法處理上述抗體陽(yáng)性人血清所得粗提液過(guò)柱(DEAE-Cellulose)收集IgG陽(yáng)性部分,再穿流正常人血清柱。得IgG(e抗體),濃縮為5ng/ml貯藏放于冰箱中。

    2.酶標記IgG(e抗體)的制備:用戊二醛二步法,將10mg  HRP交聯(lián)5 mg  IgG(e抗體),分裝于小瓶,在低溫(-20°C)下保存。

    3.ELISA對e抗原的檢測:

    a. IgG(e抗體)包被聚苯乙烯微量反應板,在4°C過(guò)一夜(IgG濃度為25r/ml)。

    b.洗滌3-5次。

    c.加待檢病員血清(1:10稀釋?zhuān)糠輼吮炯觾煽?,每?.1ml,37°c孵育2h).

    e.洗滌3-5次。

    f.加酶標記IgG(e抗體),37°C孵育2h(酶標記IgG稀釋度為1:640)。

    g.洗滌3-5次。

    h.加底物與供氫體(H2O2與OPD),置于暗處反應30min.

    i.加2mol/L硫酸終止反應。

    j.每板均設陽(yáng)性與陰性對照,根據不同的顯色反應予以判斷。

    k.經(jīng)過(guò)上訴方法檢測初步確定為陽(yáng)性的標本,取兩份,一份加足量的e抗體血清,另一份加正常人血清,在37°C孵育1h,然后再按上述方法測定e抗原。加e抗原體血清者,在顯色反應受到控制(與正常血清對比)時(shí)才可判斷為e抗原陽(yáng)性。

     

    豬弓形蟲(chóng)抗體 (Tox Ab)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
    豬弓形蟲(chóng)抗原 (Tox-Ag)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)

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