細胞名稱(chēng)          B95-8絨猴EBV轉化的白細胞 

種屬            絨猴 

組織來(lái)源          外周血 

生長(cháng)狀態(tài)          懸浮細胞 

培養條件          培養基類(lèi)型：RPMI1640培養基 

              FBS:10% 

              抗生素：雙抗 

              培養條件：37℃，CO2:5% 

傳代方法          收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)狀態(tài)： 

                  如果沒(méi)長(cháng)滿(mǎn)，將培養瓶用75%酒精消毒后在超凈臺內更換新鮮 

              培養液，繼續培養。 

                  如果細胞已經(jīng)長(cháng)滿(mǎn)（約80%-90%）則傳代后繼續培養。 

              貼壁細胞傳代方法： 

              1棄去培養基，用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次。 

              2加1ml0.25%的胰酶（含0.02%EDTA），讓胰酶與大部分細胞接觸 

              后放入37℃培養箱內，隨時(shí)觀(guān)察細胞狀態(tài)變化，待細胞大部分變 

              圓后加*培養基終止消化。 

              懸浮細胞傳代方法：可以直接傳代也可以離心法傳代。 

              1直接傳代是讓?xiě)腋〖毎恋碓谄康缀?，將上清吸?/2-2/3， 

              吹打細胞形成細胞懸液后，分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續 

              培養。 

              2離心法傳代是將細胞連同培養液一并轉移到離心管內，1000rpm， 

              5分鐘，去除上清，加新的培養液到離心管內，吹打細胞形成細胞 

              懸液后，分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續培養。 

               一般沒(méi)有特殊說(shuō)明，細胞一般是一傳二。 

凍存方法          70%*培養基，20%FBS，10%DMSO，現用現配。 

              儲存：液氮中長(cháng)期保存。 

注             1觀(guān)察細胞在低倍鏡下觀(guān)察，便于整體估計細胞密度。 

              2在運輸過(guò)程中可能會(huì )導致一些貼壁不牢的細胞發(fā)生部分脫落，可 

              離心吹打后重新種入瓶中培養。 

              3收到細胞后若發(fā)現培養瓶破損、細胞污染等，請在一周內與我們 

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